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      分享大鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)檢測試劑盒檢測范圍

      更新時間:2017-12-01      瀏覽次數(shù):1882

      大鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)檢測試劑盒操作步驟

      1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

      2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

      3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

      4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

      5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

      6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

      7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

       

      洗板方法

      手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。

      自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

       

      實驗結(jié)果計算

      以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。

      Elisa試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

      (此圖僅供參考)

      大鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒性能

      1. 檢測范圍:1.25 pg/mL – 40 pg/mL。

      2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于0.1 pg/mL。

      3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

      4. 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。

       

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