大鼠總膽固醇ELISA試劑盒-操作步驟

大鼠總膽固醇ELISA試劑盒-操作步驟

有效期：6個(gè)月

保存條件：2-8℃

樣本處理及要求

1.  血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.  血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.  組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。*后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。

4.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請(qǐng)1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注：標(biāo)本溶血會(huì)影響后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。

需要而未提供的試劑和器材

1. 酶標(biāo)儀（450nm）

2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水

實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計(jì)算出樣品的濃度。

1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD 值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6. 底物請(qǐng)避光保存。

7. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8. 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9. 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10. 試劑盒2-8℃冷藏，保質(zhì)期6個(gè)月

RJ19756 犬硫酸肝素(HS)ELISA試劑盒
RJ13685 人親環(huán)蛋白A(PPIA/CYPA)ELISA試劑盒
RJ21164 兔硫酸角質(zhì)素(KS)ELISA試劑盒
RJ15164 大鼠ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)ELISA試劑盒
RJ11718 人β血小板球蛋白;β血栓環(huán)蛋白(β-TG;NAP2)ELISA試劑盒
RJ17006 小鼠沉默調(diào)節(jié)蛋白1(SIRT1)ELISA試劑盒
RJ19889 犬胰島素樣生長(zhǎng)因子II(IGF2)ELISA試劑盒
RJ14184 人舞蹈病蛋白相互作用蛋白1(HIP1)ELISA試劑盒
RJ13184 人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒
RJ20296 雞β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒
RJ18774 豬游離血紅蛋白(f-Hb)ELISA試劑盒
RJ21224 兔神經(jīng)元烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒
RJ21073 兔谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒
RJ19994 綿羊環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒
RJ17343 小鼠抗中性粒細(xì)胞抗體(ANA)ELISA試劑盒
RJ14125 人網(wǎng)膜素1(Omentin-1)ELISA試劑盒
RJ17916 小鼠脂肪酸結(jié)合蛋白2(FABP2)ELISA試劑盒
RJ18995 牛催乳素(PRL)ELISA試劑盒
RJ19621 犬半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(CysC)ELISA試劑盒