人風(fēng)濕因子ELISA試劑盒操作步驟

人風(fēng)濕因子ELISA試劑盒操作步驟

儲(chǔ)存及有效期：
未開封的試劑盒：所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請(qǐng)注意，收到試劑盒后請(qǐng)盡快將TMB 洗滌液，終止液保存于4℃，其他試劑保存于-20℃。
使用后的試劑盒：剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存，開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。

實(shí)驗(yàn)原理：
將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入微生物化的目標(biāo)抗體，將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后，加入HRP標(biāo)記和親和素，再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（O.D.值），計(jì)算樣品濃度。
精密度：                                       
精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV表示。CV（%）=SD/mean×100
批內(nèi)差：取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè)，每份樣本連續(xù)測(cè)定20次，分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差：選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本定量測(cè)定，每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定8次，分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內(nèi)差: CV<10% Inter-批間差: CV<13%
穩(wěn)定性：
經(jīng)測(cè)定，試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存，其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對(duì)試劑盒破壞前后檢測(cè)值的影響，實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致，尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來(lái)進(jìn)行操作可減少人為誤差。
友情提醒：
試劑盒使用完畢后，請(qǐng)妥善處理相關(guān)耗材，避免環(huán)境污染！

操作時(shí)應(yīng)注意：
A. 使用移液器加液與移液槍頭不能混用。
B. 洗板要干凈，避免交叉污染。
C. 嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作，反應(yīng)時(shí)間準(zhǔn)確。
D. 請(qǐng)勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部，操作完成注意做好清潔工作。
E. 不要在測(cè)量過程中關(guān)閉電源。
F. 對(duì)于因試劑盒問題造成的測(cè)量結(jié)果的偏差，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況及時(shí)修改酶免測(cè)定試劑盒參數(shù)，以達(dá)到s實(shí)驗(yàn)效果。
G. 使用后蓋好防塵罩。
H. 出現(xiàn)技術(shù)故障時(shí)應(yīng)及時(shí)與廠家，切勿擅自拆卸酶標(biāo)儀。