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      上海仁捷生物發(fā)布-豬(NGAL2)elisa檢測原理

      更新時間:2017-06-29      瀏覽次數(shù):2117

      豬中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白2NGAL2試劑盒(ELISA)試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包豬中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白2NGAL2)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白2NGAL2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

      試劑盒組成:

       

      名稱

      96孔配置

      48孔配置

      備注

      微孔酶標(biāo)板

      8孔×12

      8孔×6

      標(biāo)準(zhǔn)品

      0.3mL*6管

      0.3mL*6管

      樣本稀釋液

      6mL

      3mL

      檢測抗體-HRP

      10mL

      5mL

      20×洗滌緩沖液

      25mL

      15mL

      按說明書進(jìn)行稀釋

      底物A

      6mL

      3mL

      底物B

      6mL

      3mL

      終止液

      6mL

      3mL

      封板膜

      2張

      2張

      說明書

      1份

      1份

      自封袋

      1個

      1個

      1.  標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:240、120、60、30、15、7.5 pg/mL

      2.  經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗,標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過zui大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時,可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實驗。

       

      實驗結(jié)果計算

      所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品濃度。(例如下圖)

       

      試劑盒性能

      •  檢測范圍7.5 pg/mL  240 pg/mL。
      •  靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 pg/mL。
      •  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
      •  重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。
      •  

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